Revisão das técnicas de biologia molecular aplicadas no diagnóstico genético pré­implantacional e uma reflexão ética / Review of molecular biology techniques used in preimplantation genetic diagnosis and ethical reflection

O diagnóstico genético pré-implantacional (PGD) é uma ferramenta que permite a selec¸ão do embrião saudável por meio da análise gênica e cromossômica. Beneficia casais no grupo de risco, como, por exemplo, casais com histórico de aborto de repetição ou com histórico familiar de doença hereditária. Diante do avanço das metodologias empregadas no PGD, esta revisão tem como objetivo reunir as informações acerca das técnicas de biópsia, de biologia molecular e aspectos bioéticos dessa prática. Assim, foi possível agregar as informações como vantagens, desvantagens, restrições e indicações referentes ao estágio embrionário em que é retirado o material genético e as técnicas de biologia molecular usadas na análise genética. Além disso, foi possível especificar alguns questionamentos bioéticos que surgem com a prática do PGD, como, por exemplo, a possível eugenia. Concluiu-se que a análise da trofoectoderme dos embriões e da aplicação da tecnologia de NGS é promissora para o futuro do PGD, bem como a primordialidade da criação de leis que regem e completam as lacunas no sentido ético e moral dessa prática.(AU)

The preimplantation genetic diagnosis (PGD) is a tool that allows the selection of healthy embrios through gene and chromosome analysis, benefiting couples at risk. Like couples with recurrent miscarriage or family history of hereditary disease. Given the advance of the methodologies used in PGD this review aims to assemble information about the biopsy techniques, molecular biology and bioethical aspects of this practice. Therefore, it was possible collect the information like advantages, disadvantages, restrictions and indications referring to embryonic stage in which is made the removal of genetic material and molecular biology techniques used in genetic analysis. In addition, some bioethic questions that arise with the practice of PGD were verified as, for example, possible Eugenia. It was concluded that the analysis of trofoectoderme of embryos and the application of NGS technology is promising for the future of PGD, as well as the primordiality the creating laws governing and complete the gaps in the ethical and moral sense of this practice.(AU)

Diagnóstico genético pré-implantacional e sua aplicação na reprodução humana assistida / Pre-implantation genetic diagnosis and application in human reproduction

INTRODUÇÃO: A infertilidade causada por fatores genéticos acomete um grande número de casais que buscam tratamento de reprodução humana assistida. O diagnóstico genético pré-implantacional (PGD) é uma técnica usada durante a reprodução humana assistida que investiga alterações cromossômicas e genéticas em embriões in vitro durante diferentes estágios de seu desenvolvimento e seleciona os embriões livres de alterações genéticas para implantação uterina. Três tipos de biópsia podem ser feitos no PGD: dos glóbulos polares, dos blastômeros e do blastocisto, em ordem cronológica de acordo com o desenvolvimento embrionário. OBJETIVO: Analisar a aplicabilidade e a relevância da técnica PGD na rotina laboratorial da reprodução humana assistida e revisar sua metodologia. MÉTODO: Revisão de literatura sobre a técnica e os questionamentos éticos envolvidos com o PGD. Resultados: Os dados existentes atualmente sugerem que não há efeitos detrimentais sobre os embriões que sofreram biópsia. No Brasil o PGD é visto como uma ferramenta no auxílio da reprodução humana assistida e apresenta questões éticas ainda em discussão. CONCLUSÕES: O PGD respeita a visão e os valores da sociedade que considera a saúde como um de seus maiores bens.

INTRODUCTION: Infertility caused by genetic factors affect a large number of couples seeking treatment assisted human reproduction. The preimplantation genetic diagnosis (PGD) is a technique used during assisted human reproduction that investigates chromosomal and genetic abnormalities in vitro embryos during different stages of development and select genetic healf embryos to the uterine implantation. Three types of biopsy may be performedin PGD: biopsy of polar cells, biopsy of blastomere and biopsy of the blastocyst in chronological order according to embryonic development. OBJECTIVE: to analyze the applicability and relevance ofthe PGD technique on human assisted reproduction laboratory routine and review its methodology. METHOD: This article provides an overview on the technical and ethical issues involved with PGD. RESULTS: Many studies suggest that there is currently no detrimental effects on embryos that underwent biopsy. PGD in Brazil is seen as a tool to aid in the assisted human reproduction and presents ethical issues still under discussion. CONCLUSIONS: The PGD respects the vision and values of the society that considers health asone of its greatest assets.

Criopreservação de oócitos / Oocytes cryopreservation

criopreservação de oócitos atualmente representa uma grande evolução em Reprodução Humana Assistida. Essa técnica consiste na conservação de células ou tecidos a temperaturas inferiores a -196¨¬C. A criopreservação de oócitos é um dos principais destaques, que surgiu com o objetivo de preservar a fertilidade feminina e, ainda, contornar as questões éticas e legais associadas ao congelamento de embriões. As técnicas de criopreservação vêm sendo aprimoradas, tendo sido observado um avanço notável nas taxas de fertilização obtidas a partir de oócitos congelados. Com base nisto, este estudo teve como objetivo realizar uma revisão bibliográfica sobre dois métodos de criopreservação (congelamento lento e vitrificação). Para isso, realizaram-se leitura e seleção de informações trabalhadas por outros autores em revistas científicas, sites de busca e livros específicos de reprodução humana assistida. Foram analisados: histórico da criopreservação de oócitos; indicações; crioprotetores; métodos de criopreservação e resultados das taxas de fertilização, gravidez e aborto segundo pesquisas já realizadas tanto com congelamento lento quanto com vitrificação de oócitos. Apesar dos resultados favoráveis à criopreservação oocitária, são necessárias mais pesquisas para que haja estabilização dos resultados e estabelecimento de uma técnica de criopreservação de oócitos humanos que seja universal e padronizada, podendo ser aplicada com sucesso nas clínicas de Reprodução Humana Assistida.

Cryopreservation of oocytes currently represents a major evolution in the human assisted reproduction. This technique consists of the conservation of cells or tissues in temperatures less than -196 ¢ªC. In view of the controversy in several cultures on legal and ethical issues associated with the freezing of embryos, the development of techniques that could solve this problem became necessary. The cryopreservation of oocytes is one of the highlights, aiming to preserve the fertility of women. The techniques of cryopreservation have been improving in search of quality and good results. Nowadays, we observe a progress in fertilization rates obtained from frozen oocytes. Our objective was to carry out a bibliographic review of two methods of cryopreservation (slow freezing and vitrification). In order to do that, we read and checked information provided by other authors in scientific journals, search engines and books on human assisted reproduction. We analyzed: history of oocytes cryopreservation; indications; cryoprotectors; methods and results of cryopreservation of fertilization, pregnancy and abortion rates, according to other surveys on slow freezing and oocyte vitrification. Despite the favorable results of oocytes cryopreservation, further studies are necessary to stabilize the results and to establish a technique which be universal for cryopreservation of human oocytes and can be successfully applied in human assisted reproduction clinics.